Молодой учёный Паша мечтал создать эффективный биотехнологический процесс для производства редкого фермента, способного разлагать пластик. Для этого ему нужно было встроить в плазмиду ген интересующего
фермента, внедрить её в бактерии, отобрать успешные трансформанты и выйти на промышленный уровень. Выбранная Пашей плазмида уже содержала ген устойчивости к антибиотику. Биореакторы используются для масштабного культивирования микроорганизмов в контролируемых условиях. Электрофорез применяется для разделения смесей ДНК, позволяя определить размер полученных молекул. Рестрикционные нуклеазы используются для разрезания ДНК в строго определённых местах, что позволяет выделять, модифицировать и вставлять необходимые гены в плазмиды. Какой последовательности действий Паше следует придерживаться, чтобы добиться успеха?
1 Ответ
1. Сначала провести электрофорез целой плазмиды, затем использовать рестрикционные нуклеазы, далее поместить бактерии на среду с антибиотиком, после чего вырастить их в биореакторе
2. Сначала использовать рестрикционные нуклеазы, затем провести электрофорез для проверки успешности вставки, позже поместить бактерии на среду с антибиотиком, после чего начать культивирование в биореакторе
3. Сначала вырастить бактерии в биореакторе, затем провести электрофорез, потом разрезать ДНК рестрикционными нуклеазами и отобрать бактерии на среде с антибиотиком
4. Сначала поместить бактерии на среду с антибиотиком, затем провести электрофорез, потом разрезать ДНК рестрикционными нуклеазами, а в конце вырастить бактерии в биореакторе